技術文章
如何搭配流式抗體熒光標記點擊次數：1331 更新時間：2014-10-23
流式抗體熒光標記搭配主要由3個因素決定的：流式細胞儀能檢測多少個通道、需要同時檢測檢測多少個指標、廠家的抗體有多少種熒光標記。如果流式細胞儀的通道越多，那么同一份樣本能同時做的表面/胞內標志就越多.
A、 如何根據流式細胞儀搭配流式抗體
流式細胞儀能檢測多少個通道是由有多少根激光決定的以及每根激光的功能決定的，所以首先需要注意兩點：
流式細胞儀有哪些激光。
不同型號的流式細胞儀的同樣的一個通道檢測熒光素的能力是不一樣的.
B、搭配熒光素原則
搭配流式熒光素有2個原則：每個通道只能選擇1種熒光素；各個通道之間的熒光素可以隨意搭配，但需注意的是，APC和PE-Cy5一起使用的話，上流式以后，容易導致補償過度。
C、如果檢測的指標數目超過了流式細胞儀的通道，怎么辦？
如果需要做5個指標，而流式細胞儀只能做4個通道，首先將指標歸成2類，再將樣本分成2份，分別檢測。比如需要同時檢測CD3、CD4、CD8、IL-4和IFN-gamma，那么將樣本分成兩份，第1份加CD3、CD4、CD8和IL-4，而第2份加CD3、CD4、CD8和IFN-gamma。
|
|||||
|
|||||
 |
